凍存細胞時，還在堅持緩凍原則嗎？
一、我們先來說說何為緩凍：
緩凍即為凍存細胞時，要程序降溫——4℃ 30min，-20℃ 1h ，-80℃ 過夜，次日投入液氮內。
二、那為什么要進行緩凍呢？
其實所謂的緩凍是一般使用傳統凍存液凍存過程中需要程序降溫。
傳統的凍存液，一般由胎牛血清、DMSO及基礎培養基等組分組成。凍存保護的DMSO組分，在進入細胞后結合細胞內部的水份，降低冰點，防止細胞在冷凍過程中形成冰晶對細胞造成損害。
但是DMSO只能在細胞內部保護細胞，細胞外部沒有保護，水結冰晶會在細胞膜外部受到損傷，為了防止冰晶過大，使用時必須采用程序降溫的方式，才可保證細胞復蘇的成功率（80%以上）。
若不采用程序降溫的形式，有些凍存的細胞，甚至復蘇成功率為0。
三、無血清細胞凍存液幫您輕松凍細胞！
無血清細胞凍存液，為多種保護劑組合，在細胞內外進行雙重保護，大大提高了細胞復蘇存活率。無血清細胞凍存液，含多種保護劑成分。
一些保護劑，易于穿透細胞，避免細胞內部水分子形成冰晶損傷細胞，同時另一些保護劑不能穿透細胞，但可以在冰晶形成之前，優先結合細胞外的水分子，降低細胞外溶液的電解質濃度，減少陽離子進入細胞的數量，我公司無血清細胞凍存液，為多種保護劑組合，在細胞內外進行雙重保護，大大提高了細胞復蘇存活率。
附：
1.傳統細胞凍存液與無血清細胞凍存液使用方法對比
| 使用步驟 | 傳統凍存液 | 無血清凍存液 |
| 產品保存條件 | 分裝成小管,-20度（避免反復凍融） | 2-8度保存,無需分裝 |
| 凍存過程 | 程序降溫（4度30min， -20度1h ,-80度過夜,次日投入液氮內） | 直投-80度冰箱過夜,次日入液氮 |
| 復蘇過程 | 快復蘇,加新鮮培養液,離心取出保護液 | 快復蘇,加新鮮培養液,離心取出保護液 |
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2.凍存后細胞復蘇數據對比
|
細胞系名稱 |
傳統凍存液 |
YOCON凍存液 |
|
A549(肺癌) |
85% |
95% |
|
MDCK(犬腎細胞) |
90% |
95% |
|
3T3(小鼠胚胎成纖維細胞) |
90% |
93% |
|
hepG2(肝癌細胞) |
86% |
93% |
|
MK2 (恒河猴腎細胞) |
88% |
95% |
|
雜交瘤細胞 |
80% |
90% |
|
MSC(間充質干細胞) |
80% |
95% |
|
單個核細胞(原代分離) |
50% |
90% |
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