實驗室檢驗檢測工具--土壤dna提取試劑盒
土壤的成分包括礦物質、粘土等無機物、植物及植物的遺體、腐殖物質等土壤有機物以及在土壤中存在的微生物。
從土壤中提取的DNA,是微生物、動植物遺體等的總DNA,同時,腐殖物質的性質與DNA很相似,DNA提取過程中會將腐殖等物質一起純化,采用傳統的DNA提取方法來除去腐殖物質等抑制因子是十分困難的。而這些腐殖物質會抑制聚合酶鏈式反應(PCR)及限制性酶切等。因而,從土壤中提取DNA,腐殖物質等抑制因子的除去干凈是重中之重。廣州捷倍斯生物科技有限公司根據腐殖物質等特點,發明了高效的腐殖酸吸附劑,再與硅膠柱純化的技術結合,開發出了高效土壤DNA提取試劑盒(SoilDNAKit),已為廣大客戶所采用,完全能夠替代價格昂貴的進口產品。
土壤樣品加入懸浮緩沖液Buffer C1,并加入玻璃珠與ZL的腐殖酸吸附劑Buffer C2,渦旋使土壤充分重懸,腐殖物質充分釋放,讓吸附劑有效吸附腐殖酸。再加入高效的裂解液Buffer C3并渦旋在玻璃珠的摩擦作用下,裂解土壤中的所有生物包括G+細菌、酵母菌、真菌、藻類、線蟲甚至真細菌的孢子、芽孢、動植物遺體等,游離DNA。之后,再加入沉淀劑Buffer C4,離心沉淀除去土壤殘渣、吸附有腐殖酸的吸附劑、多糖多酚、絕大部分的色素等,獲得清亮的、含有DNA的上清,上清加入異丙醇沉淀獲得DNA粗品。粗品中加入ddH2O溶解后,再加入Buffer C5離心進一步除去腐殖酸等雜質,獲得上清,往上清加入乙醇后轉移到硅膠純化柱中過柱吸附DNA,除去雜質。再加入漂洗液Buffer WB離心進一步除去蛋白質、腐殖酸等雜質,加入漂洗液DNA Wash Buffer除去鹽分等。干燥柱子后加入滅菌去離子水后,離心獲得高純的DNA。
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