高效液相色譜法與經(jīng)典液相色譜法的主要區(qū)別
一、類型不同
1、高效液相色譜法
1）吸附色譜法(Adsorption Chromatography)
2）分配色譜法(Partition Chromatography)
3）離子色譜法(Ion Chromatography)
4）分子排阻色譜法/凝膠色譜法(Size Exclusion Chromatography)
5）鍵合相色譜法（bonded-phase chromatography）
6）親和色譜法(Affinity Chromatography)
2、經(jīng)典液相色譜法
1）吸附色譜法
吸附色譜法的固定相為吸附劑，色譜的分離過程是在吸附劑表面進(jìn)行的，不進(jìn)入固定相的內(nèi)部。
2）分配色譜法
這種色譜的流動相和固定相都是液體，樣品分子在兩個液相之間很快達(dá)到平衡分配，利用各組分在兩相中分配系數(shù)的差異進(jìn)行分離，類似于萃取過程。
3）離子交換色譜
離子交換色譜通常用離子交換樹脂作為固定相。一般是樣品離子與固定相離子進(jìn)行可逆交換，由于各組分離子的交換能力不同，從而達(dá)到色譜的分離。
二、特點不同
1、高效液相色譜法
①高壓：流動相為液體，流經(jīng)色譜柱時，受到的阻力較大，為了能迅速通過色譜柱，必須對載液加高壓。
②高速：分析速度快、載液流速快，較經(jīng)典液體色譜法速度快得多，通常分析一個樣品在15～30分鐘，有些樣品甚至在5分鐘內(nèi)即可完成，一般小于1小時。
③高效：分離效能高?？蛇x擇固定相和流動相以達(dá)到最佳分離效果，比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。
2、經(jīng)典液相色譜法
以液體作為流動相，固定相可以有多種形式，如紙、薄板和填充床等。
三、應(yīng)用不同
1、高效液相色譜法
由于高效液相色譜法具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用，流出組分易收集等優(yōu)點，因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無機(jī)分析等各種領(lǐng)域，并已成為解決生化分析問題最有前途的方法。
2、經(jīng)典液相色譜法
液相色譜是常溫操作，不受樣品揮發(fā)度和熱穩(wěn)定性的限制，它非常適合相對分子量較大，難汽化，不易揮發(fā)或?qū)崦舾械奈镔|(zhì)、離子型化合物和高聚物的分離分析，大約占有機(jī)物的70%~80%。
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技術(shù)原理
