干細(xì)胞磁珠分選和流式分選的區(qū)別
應(yīng)管理員要求，我來(lái)比較一下流式分選和磁珠分選的優(yōu)缺點(diǎn)，本來(lái)想列一個(gè)表，但表格可能表述不清楚，還是用通俗的語(yǔ)言寫啊，個(gè)人體會(huì)歡迎拍磚。
簡(jiǎn)單說(shuō)一下原理：
現(xiàn)在流式分選一般都是電荷式分選，即對(duì)感興趣的目標(biāo)細(xì)胞所在的液滴充上電荷，液滴經(jīng)過(guò)電極板，通過(guò)電場(chǎng)作用發(fā)生偏轉(zhuǎn)，從而實(shí)現(xiàn)分選。
磁珠分選首先使用磁珠偶聯(lián)的抗體去標(biāo)記細(xì)胞，然后把標(biāo)記好的細(xì)胞過(guò)柱子（柱子周圍連磁鐵），帶磁珠的細(xì)胞就留在柱子上，不帶磁珠的細(xì)胞就流走了，從而實(shí)現(xiàn)分選。
現(xiàn)在可以比較不同了：
1、對(duì)細(xì)胞的刺激。 我覺得磁珠分選最大的優(yōu)勢(shì)就是對(duì)細(xì)胞的刺激要小一點(diǎn)。因?yàn)榱魇椒诌x細(xì)胞首先要經(jīng)過(guò)幾十微米的噴嘴，然后要被充電，還要經(jīng)過(guò)幾千伏的電場(chǎng)，最后以幾十米每秒的速度落到收集管里面，有些原代細(xì)胞就受不了，分選免疫細(xì)胞也要考慮細(xì)胞活化的影響；而磁珠分選相對(duì)來(lái)說(shuō)就對(duì)細(xì)胞沒(méi)什么刺激。
2、設(shè)備要求。 磁珠分選小的實(shí)驗(yàn)室就能做，買一些專用的磁鐵和柱子就可以了，而流式分選就需要分選型的流式細(xì)胞儀，都是幾百萬(wàn)以上的。對(duì)操作員的要求來(lái)說(shuō)，流式分選也要高一點(diǎn)，需要專門培訓(xùn)，需要注意的細(xì)節(jié)也要多很多。
當(dāng)然如果你周圍有什么流式平臺(tái)的話，磁珠分選和流式分選的成本應(yīng)該是差不多的，流式分選一次大約1-2千（各地方不同），磁珠分選的柱子磁珠差不多也要燒這么多錢。
3、試劑不同。 這個(gè)最好理解，流式分選用的是熒光素偶聯(lián)的抗體，磁珠分選用的是磁珠結(jié)合的抗體。
下面就要說(shuō)下流式分選的優(yōu)勢(shì)了：
4、分選純度。這個(gè)肯定是流式分選的純度高，磁珠分選如果操作好的話也能達(dá)到80-90%的純度，但流式分選一般都能達(dá)到90％以上（樣本制備和儀器條件正常的條件下）。
5、多參數(shù)分選。流式細(xì)胞術(shù)很大的優(yōu)勢(shì)就是多參數(shù)，比如我可以分選CD4+CD25+CD127low的Treg，三色的一次就能分選。磁珠分選就必須先分CD4，再分CD25，更多參數(shù)的就沒(méi)法進(jìn)行。
6、低表達(dá)群細(xì)胞分選。比如有些干細(xì)胞它的表達(dá)比例只有百分之零點(diǎn)幾，比例太少磁珠分選無(wú)法操作，流式就可以把這些細(xì)胞富集起來(lái)。
7、胞內(nèi)熒光分選。流式分選在分子生物學(xué)中很大一部分應(yīng)用就是分選GFP、YFP等陽(yáng)性細(xì)胞，還有可以用Hoechst染精子的單倍體進(jìn)行分選，這些針對(duì)胞內(nèi)成分的分選也是磁珠分選無(wú)法實(shí)現(xiàn)的。
另外要說(shuō)明的是，現(xiàn)在都很流行磁珠分選和流式分選相結(jié)合的方法，像上面舉的例子分選CD4+CD25+CD127low的Treg，如果僅用流式分選可能時(shí)間太長(zhǎng)，純度也有影響。那么可以選擇先用磁珠純化出CD4陽(yáng)性的細(xì)胞，再過(guò)流式分選CD4+CD25+CD127low的群體，這樣既節(jié)省了時(shí)間保證了活性，也可以提高分選的純度。
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