如何精確測定死時間和死體積
一般情況下在流動相中不保留的成分，出來的第一個峰就是死時間。因此，死體積=死時間X流量。
死時間( t0)是液相色譜中的重要參數(shù)，其值的精確測定對分離條件的優(yōu)化和色譜熱力學(xué)研究具有重要意義。在反相色譜中．固定相極性較弱．流動相一般為強(qiáng)極性的水、甲醇、乙腈等．故通常采用極性更強(qiáng)的NaNO3或NH4No3作為標(biāo)記物，進(jìn)行死時間的測定。但由于標(biāo)記物與固定相之間，存在著一定的相互作用．因此測定結(jié)果會與真實(shí)死時間有一定的偏離。
通常以NaNO3等強(qiáng)極性溶質(zhì)進(jìn)行反相液相色譜中死時間測定時，其與固定相之問極弱的相互作用可以忽略不計(jì)。這種方法得到的死時間可以進(jìn)一步用于色譜保留機(jī)理的熱力學(xué)研究和分離條件的優(yōu)化。
高效液相色譜中死時間是個非常重要的基礎(chǔ)參數(shù)。在進(jìn)行色譜條件優(yōu)化及定性鑒定時都需要用到。
液相色譜中的基本理論與氣相色譜相同，但液相色譜系統(tǒng)與氣相色譜系統(tǒng)卻有很大差別 如液體的擴(kuò)散系數(shù)和料顆粒的孔體積，也包括填料顆粒間的孔隙體積．故影響死時間的因素也比氣相色譜復(fù)雜得多。
在色譜中測定死時間通常有兩種方法，一是用所謂的無保留的探測物如脲嘧啶、D2O、某些無機(jī)鹽等直接測定；二是根據(jù)同系物的保留時間用數(shù)學(xué)方法進(jìn)行計(jì)算求取死時間。
測定死時間最簡單的方法：
液固色譜死時間：可用苯、四氯乙烯或KNO3水溶液作探針測死時間。
液液色譜死時間：反相用NaCI、NaNO3、HNO3、HCIO3、苯甲酸、苦味酸、尿嘧啶水溶液測死時間，但測量誤差較大。正相用四氯乙烯、四氟乙烯測死時間。附文1)反向液相色譜中測定死時間的新方法2)反相高效液相色譜中死時間的測定
