用酸沉淀法濃縮蛋白質實驗——丙酮沉淀法
實驗材料 | |
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試劑、試劑盒 | |
儀器、耗材 | |
實驗步驟 | 1. 加 1 ml冷丙酮(-20℃)至 200 ul 樣品溶液,混勻。 2. -20℃: 放置 10 min。 3. 小型臺式離心機離心 5 min。 4. 棄去上清液,使沉淀風干。 5. 于 1~2 倍沉淀體積的緩沖液中再懸浮沉淀。 |
注意事項 | 1. 反復用丙酮洗滌和沉淀蛋白質 。 2. 通過延長 -20℃ 的放置時間,達 2 h 以上,再用 27 000 × g 離心 10 min,可以定量沉淀小于 1 ug 蛋白質。 3. 中性鹽提高蛋白質在有機溶劑中的溶解度,二價陽離子降低蛋白質在有機溶劑中的溶解度。 |
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