奶牛早期妊娠診斷的熒光定量 PCR 檢測方法
適用范圍:
本標準規定了奶牛早期妊娠的熒光定量PCR檢測方法原理、試劑和材料、儀器和設備、測定方法、衛生要求以及廢棄物處理。
本標準適用于一級生物安全水平(BSL-1)以上的獸醫實驗室,用于奶牛人工授精后第18天是否妊娠的診斷性檢測。
該方法利用熒光定量PCR技術聯合檢測奶牛外周血白細胞中干擾素刺激基因ISG15和RSAD2的表達量,通過計算P值來判斷早期妊娠。具體操作步驟包括樣本采集、保存與運輸,RNA提取,逆轉錄反應,熒光定量PCR檢測等。
結果判斷依據是敏感性(真陽性率)為94.7%時的診斷點:當P≥0.680時判定為妊娠,否則為空懷。同時,該方法還涵蓋了衛生要求、廢棄物處理及檢測報告的相關規定。
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