普通PCR方法耗時長,操作繁瑣,靈敏度不夠,容易產交叉污染,質控復雜,假陽性、假陰性比例偏高。實時熒光定量PCR方法靈敏度高,但成本昂貴,技術要求高,且必須使用大型儀器設備。 此次福建運用LAMP這種新穎的恒溫核酸擴增方法,在轉基因特異品系檢測領域有效建立了普遍適用于檢驗檢疫一線基層實驗室的快速、簡便、高效的轉基因品系檢測方法,檢測成本遠低于熒光定量PCR。...
這兩個步驟均可通過普通PCR或者實時熒光定量PCR方法完成。第五步:確證實驗如果采用普通PCR方法檢測篩選基因與結構特異性基因或品系特異性基因結果為陽性,則需要通過采用實時熒光PCR方法進行結果確證實驗。...
不同平臺的具體應用和特點: 1、QuantStudio系列實時熒光定量PCR平臺 對于 GMO 的檢測,目前最常用的是 qPCR 方法。篩選檢測為檢測通用的啟動 子與終止子序列,特異性品系檢測為檢測編碼區域序列。對于未知的品系,需先對編碼區進行測序,然后設計特異的引物探針進行檢測。為了避免假陽性,可通過對 PCR 產物測序而進行最終的確認。 ...
這些因素都制約了Southern法在T0代植物中檢測外源基因拷貝數的應用。 二、熒光定量PCR方法 利用新型、靈敏、高通量的實時熒光定量PCR方法可以用于測定原始品系中轉基因的絕對拷貝數。實時熒光定量PCR技術是一種較新的DNA 定量方法。...
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